Page 24 - CURA covid-19
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COVID-19. Manuale di prevenzione e trattamento

L'obiettivo della discussione MDT è di ottenere un trattamento personalizzato. Il piano di trattamento
dovrebbe essere adattato a ogni persona quando si considerano le differenze tra individui, decorso
della malattia, e tipi di pazienti.
La nostra esperienza è che la collaborazione MDT può migliorare notevolmente l'efficacia della
diagnosi e trattamento di COVID-19.

II. Indicatori di eziologia e infiammazione

1 Rilevazione di acido nucleico SARS-CoV-2

     1. 1 Raccolta dei campioni
     Importanti campioni, metodi di raccolta e tempistica della raccolta sono importanti per migliorare
     la sensibilità di rilevamento. I tipi di campione includono: campioni delle vie aeree superiori
     (tamponi faringei, tamponi nasali, secrezioni rinofaringee), campioni delle vie aeree inferiori
     (espettorato, secrezioni delle vie aeree, liquido di lavaggio broncoalveolare), sangue, feci, urina
     e secrezioni congiuntivali. Espettorato e altri campioni del tratto respiratorio inferiore hanno alto
     tasso positivo di acidi nucleici e dovrebbe essere raccolti preferenzialmente. SARS-CoV-2 prolifera
     preferenzialmente nelle cellule alveolari di tipo II (AT2) e nel picco di diffusione virale appare
     da 3 a 5 giorni dopo l'inizio della malattia. Pertanto, se il test dell'acido nucleico è all'inizio
     negativo, i campioni dovrebbero continuare a essere raccolti e testati giorni successivi.

     1.2.Rilevazione di acido nucleico
     Il test dell'acido nucleico è il metodo preferito per diagnosticare l'infezione da SARS-CoV-2. Il
     il processo di test secondo le istruzioni del kit è il seguente: I campioni sono pre-elaborato e
     il virus viene lisato per estrarre acidi nucleici. I tre geni specifici di SARS-CoV-2, ovvero il telaio
     di lettura aperto 1a / b (ORF1a / b), proteina nucleo capside I geni (N) e le proteine di invilup-
     po (E) vengono quindi amplificati mediante PCR quantitativa in tempo reale tecnologia. I geni
     amplificati sono rilevati dall'intensità della fluorescenza. Criteri di risultati positivi dell'acido
     nucleico sono: il gene ORF1a / b è positivo e/o il gene N/E è positivo.
     La rilevazione combinata di acidi nucleici da più tipi di campioni può migliorare l'accuratezza dia-
     gnostica. Tra i pazienti con acido nucleico positivo confermato in tratto respiratorio, circa il 30% -
     40% di questi pazienti ha rilevato acido nucleico virale in il sangue e circa il 50% - 60% dei pazienti
     ha rilevato acido nucleico virale nelle feci. Tuttavia, il tasso positivo di test dell'acido nucleico
     nei campioni di urina è piuttosto basso. Test combinato con campioni di vie respiratorie, feci,
     sangue e altri tipi di campioni sono utili per migliorare la sensibilità diagnostica dei casi sospetti,
     monitorare l'efficacia del trattamento e la gestione dell'isolamento post dimissione le misure.

2 Isolamento e cultura del virus

     La coltura del virus deve essere eseguita in un laboratorio con livello di sicurezza biologica qualificato
     3 (BSL-3). Il processo è brevemente descritto come segue: nuovi campioni di espettorato del pazien-
     te, le feci, ecc. vengono ottenute e inoculate su cellule Vero-E6 per la coltura del virus. Il citopatico
     effetto (CPE) si osserva dopo 96 ore. Rilevazione di acido nucleico virale in coltura il mezzo indica
     una cultura di successo. Misura del titolo del virus: dopo aver diluito il virus concentrazione dello
     stock di un fattore 10 in serie, il TCID50 è determinato dal metodo microcitopatico. Altrimenti, la
     vitalità virale è determinata dalla formazione della placca unità (PFU).
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